Международный неврологический журнал 1 (71) 2015

Статья опубликована на с. 81-86

Проблема реабилитации детей, родившихся недоношенными, с перинатальным гипоксически–ишемическим поражением центральной нервной системы (п.п.ЦНС), весьма актуальна. Повреждение головного мозга, связанное с церебральной ишемией, встречается у 48 % новорожденных [1], а среди недоношенных детей — у 60–70 % [2].

Одним из распространенных неврологических синдромов у недоношенных детей, перенесших п.п.ЦНС, является синдром вегетативных дисфункций (СВД). В настоящее время отсутствует единая патогенетически ориентированная система реабилитации этой категории детей. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что у детей с СВД также манифестируют иммунные расстройства, затрагивающие преимущественно процессы иммунорегуляции и антителообразования [3, 4].

Учитывая вышеизложенное, мы поставили перед собой цель изучить эффективность применения комплекса полипептидных фракций (Кортексина) в комбинации с поливитаминно–аминокислотно–минеральным комплексом для коррекции иммунного статуса этих детей.

Кортексин — нейропептидный препарат, представляющий собой комплекс низкомолекулярных пептидов, выделенных из коры головного мозга крупного рогатого скота и свиней, не достигших 12–месячного возраста. Обладает выраженной метаболической активностью, влияя на нормализацию обмена нейромедиаторов, регуляцию баланса тормозных/активирующих аминокислот и уровня серотонина и дофамина, оказывает ГАМКергическое действие, антиоксидантный эффект, участвует в нормализации биоэлектрической активности мозга.

Поливитаминно–аминокислотно–минеральный комплекс применялся в виде сиропа, в 1 мл которого содержится 20 мг L–лизина гидрохлорида, 204 мг 50% раствора кальция глицерофосфата (соответствует 8,67 мг кальция, 13,33 мг фосфата), 0,2 мг тиамина, 0,23 мг рибофлавина, 0,4 мг пиридоксина, 1 мкг (40 МЕ) холекальциферола, 1 мг D, L–токоферола ацетата, 1,33 мг никотинамида, 0,67 мг D–пантенола. Набор компонентов обеспечивает нейротропный, цитопротекторный, иммуномодулирующий, мембраностабилизирующий и антиоксидантный эффект.

Материалы и методы

Эффективность применения комплекса полипептидных фракций (Кортексина) в комбинации с поливитаминно–аминокислотно–минеральным комплексом для лечения детей с СВД, родившихся недоношенными, с п.п.ЦНС, была изучена у 45 пациентов 12–14–летнего возраста (основная группа), которые находились на лечении в областной детской клинической больнице № 1 и областной детской консультативной поликлинике г. Харькова.

Диагноз «синдром вегетативной дисфункции» выставлялся в соответствии с МКБ–10 (G 90.9 Расстройство вегетативной нервной системы, неуточненное, Мартынюк, 2001), верифицирован с учетом патогномоничных клинических проявлений заболевания, данных лабораторных и инструментальных исследований. Дети основной группы также получали курс базисной терапии, включающий пантокальцин и тенотен детский.

Комплекс полипептидных фракций (Кортексин) был назначен в виде лечебного эндоназального электрофореза. Преимущества способа связаны с тем, что инъекционное введение препарата имеет травматический характер и несет риск развития постинъекционных осложнений; за счет изменения места введения препарата достигается усиление его проникновения через гематоэнцефалический барьер, а также снижение психотравмирующей и фармакологической нагрузки на пациента.

Курс лечения составлял 10–12 процедур. Три первые процедуры выполнялись 10–15 минут каждая, с использованием силы тока 1 мА, а последующие — 15–20 минут каждая, с силой тока 3 мА [5].

Поливитаминно–аминокислотно–минеральный комплекс назначался перорально в дозе 4 мл в сутки [6].

Дети группы сравнения (35 детей 12–14 лет) получали курс базисной терапии, не содержащей комплекса полипептидных фракций (Кортексина) и поливитаминно–аминокислотно–минерального комплекса. Контрольную группу составили здоровые дети (30 человек) того же возраста.

Программа иммунологических исследований включала изучение содержания в ротовом секрете sIgA, IgA, IgG и лизоцима, в сыворотке крови — основных классов иммуноглобулинов, IgE, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), комплемента, аффинности IgG–антител к общей антигенной детерминанте (ОАД) микробов, основных классов иммунорегуляторных цитокинов, популяционного и субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови, уровня пролиферативной активности Т–лимфоцитов на митоген фитогем–агглютинина (ФГА). Содержание лизоцима в ротовом секрете определяли рано утром натощак методом диффузии в агаре [7]. Концентрацию в ротовом секрете и сыворотке крови иммуноглобулинов различных классов определяли спектрофотометрически [8], концентрацию IgЕ — методом иммуноферментного анализа (ИФА), в соответствии с прилагаемой инструкцией. Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови оценивали методом селективной преципитации с полиэтиленгликолем–6000 [9]. Об активности комплемента судили по 50% гемолизу тест–системы.

Аффинность антител (IgG) оценивали по методике R. Luxton и E. Tompson (1990) [10]. Содержание IgG–антител к ОАД бактерий определяли с помощью ИФА на аппарате Stat Fax 303 Plus (США). Аффинность антител выражали в относительных единицах.

Популяционный состав лимфоцитов периферической крови определяли методом проточной лазерной цитометрии с использованием моноклональных антител разной специфичности на аппарате FACSC Calibun (США). О содержании Th₁– и Th₂–клеток судили по уровню в цитоплазме лимфоцитов ИЛ–4 и ИНФ–y [11, 12].

Пролиферативную активность лимфоцитов оценивали в реакции бласттрансформации лимфоцитов с ФГА [13]. Интенсивность реакции оценивали морфологически в процентах образованных бластных форм.

Статистическую обработку данных проводили с помощью Microsoft Ecxel 2007 и программы Med Stat (серийный № MS000055) ДИВП ООО «Альфа», г. Донецк, в соответствии с рекомендациями по статистической обработке медико–биологических данных [14, 15]. Проводили проверку выборок на нормальность распределений (критерий x²), вычисляли среднее арифметическое (M) и среднюю ошибку средней величины (m), определяли достоверность различий по критерию t Стьюдента. Критический уровень значимости считали равным 0,05 [16–18].

Результаты и обсуждение

В предварительных исследованиях было установлено, что добавление к традиционной терапии полипептидных фракций (Кортексина) не приводит к полной и продолжительной нормализации иммунного статуса больных с СВД. С учетом полученных результатов в комплексное лечение детей был добавлен поливитаминно–аминокислотно–минеральный комплекс, обладающий иммунорегуляторным действием. Было установлено, что у детей, получивших в комплексном лечении полипептиды (Кортексин) в комбинации с поливитаминно–аминокислотно–минеральным комплексом, уже к концу первого месяца после окончания лечения происходит полное восстановление как гуморального, так и цитокинового статуса. У детей, получавших комбинацию нейротропного препарата и препарата, регулирующего метаболические процессы, уже в первый день после окончания терапии в ротовом секрете достоверно повышалось содержание sIgA, mIgA, IgG и лизоцима, которое в этот срок достигало значений нормы и через месяц оставалось таким же (табл. 1). У детей группы сравнения, получавших традиционное лечение, столь заметных изменений в показателях местного иммунитета не происходило, ни в один из сроков изученные показатели не достигали значений нормы (табл. 1).

У детей основной группы в сыворотке крови после окончания лечения достоверно повышалось содержание IgA и снижалось изначально повышенное содержание IgE. Полная нормализация концентрации IgA наблюдалась в первый день после окончания терапии, IgE — к концу первого месяца после окончания терапии (табл. 2).

При этом существенных изменений в содержании в сыворотке крови IgM, IgG, ЦИК и комплемента не происходило. Следует заметить, что значения этих показателей до начала лечения соответствовали норме.

Также динамично возрастала аффинность IgG–антител к ОАД микробов под влиянием проводимой терапии. В первый день после окончания лечения наблюдалось достоверное ее повышение, а через месяц аффинность антител соответствовала значениям нормы (табл. 3).

У детей группы сравнения, получавших традиционное лечение, существенных изменений в содержании в сыворотке крови основных классов иммуноглобулинов, IgE, ЦИК, комплемента и аффинности IgG–антител не происходило (табл. 2, 3).

Исследование цитокинового статуса показало, что у детей, получавших полипептиды (Кортексин) в комбинации с поливитаминно–аминокислотно–минеральным комплексом, уже в первый день после окончания терапии происходило снижение до уровня нормы повышенных значений ИЛ–1b, ИЛ–4, ИЛ–10 (табл. 4). У данных детей в этот срок также отмечалась нормализация соотношения провоспалительных и противовоспалительных цитокинов ИЛ–1b/ИЛ–10, ИЛ–6/ИЛ–10, ФНО–y/ИЛ–10, а также цитокинов ИЛ–4/ИНФy, регулирующих тип развития иммунной реакции. У детей в первый день после окончания лечения индексы соотношения ИЛ–1/ИЛ–10 составляли 0,24 ± 0,02, до лечения — 0,28 ± 0,03 (р < 0,05) (норма — 0,24 ± 0,02), ИЛ–6 — 1,39 ± 0,14, до лечения — 1,15 ± 0,12 (р < 0,05) (норма — 1,45 ± 0,15), ФНО–a/ИЛ–10 — 0,073 ± 0,007, до лечения — 0,058 ± 0,006 (р < 0,05) (норма — 0,0750 ± 0,0070), ИЛ–4/ИНФ–y — 1,28 ± 0,13, до лечения — 2,03 ± 0,21 (р < 0,05) (норма — 1,03 ± 0,11). Через один месяц после окончания лечения происходила дальнейшая нормализация содержания всех изученных цитокинов.

В группе сравнения достоверных изменений в содержании цитокинов и их соотношении за весь период наблюдения выявлено не было (табл. 4).

У детей основной группы под влиянием предложенной терапии в первый день после ее окончания в периферической крови достоверно повышалось содержание общих Т–лимфоцитов (CD3+–клеток), CD4+–кле–ток, их бласттрансформирующая активность, нормализовалось содержание Th₂–клеток (ИЛ–4) и баланс Th₁/Th₂–клеток и Th₂/Treg–клеток (табл. 5). В этот срок и через один месяц после окончания терапии популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови этих детей соответствовал показателям здоровых детей (контрольной группы).

Традиционная терапия, не содержащая полипептиды (Кортексин) в комбинации с поливитаминно–аминокислотно–минеральным комплексом, подобным эффектом не обладала. У детей группы сравнения нормализация измененных показателей не происходила (табл. 5). Через один год у детей определялись нарушения в иммунном статусе, подобные тем, которые были выявлены до лечения.

Обследование детей основной группы через один год после курса терапии не выявило каких–либо нарушений в их иммунном статусе. Иммунный статус детей характеризовался нормальным содержанием в периферической крови лимфоцитов, их популяционным и субпопуляционным составом, высокой способностью клеток к пролиферации под влиянием митогенного стимула, нормальным содержанием в сыворотке крови основных классов иммуноглобулинов и IgE, нормальным уровнем провоспалительных и противовоспалительных цитокинов и их балансом.

Результаты проведенных исследований позволяют заключить, что включение в комплексное лечение детей с СВД, у которых неврологические расстройства сопровождаются иммунными нарушениями, комплекса полипептидных фракций (Кортексина) — ноотропного препарата и поливитаминно–аминокислотно–минерального комплекса — препарата с иммуномодулирующими свойствами позволяет в короткие сроки достичь стабильного эффекта в восстановлении иммунореактивности детей.

Параллельно нами было установлено, что применение этих препаратов в комбинации оказывает выраженный положительный эффект и на неврологический статус детей. Представляется, что одновременное применение препаратов с адресным действием на ЦНС и иммунную систему позволяет более эффективно восстановить работу этих тесно взаимосвязанных систем организма и получить потенцирующее действие одной системы на другую.

Выводы

Полученные данные позволяют рекомендовать комплекс полипептидных фракций (Кортексин) в комбинации с поливитаминно–аминокислотно–минеральным комплексом для реабилитации детей с СВД, ассоциированным с иммунными расстройствами.

Применение Кортексина в виде эндоназального электрофореза в комбинации с поливитаминно–аминокислотно–минеральным комплексом позволяет эффективно восстанавливать иммунный статус детей с СВД, родившихся недоношенными, с перинатальным поражением ЦНС, а способ применения Кортексина является комфортным, экономичным, не вызывающим побочных реакций.